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分析型高效液相色譜儀的性能特點
分析型高效液相色譜儀的性能特點
更新時間:2025-09-10
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分析型高效液相色譜儀是當今化學與生物實驗室中分離分析工具。它以其高分離效能、高靈敏度和廣泛應用的特點,在藥物研發(fā)、食品安全、環(huán)境監(jiān)測等諸多領域發(fā)揮著關鍵作用。
一臺完整的分析型高效液相色譜儀是由幾個關鍵子系統精密協同工作的結果:
1.溶劑輸送系統:主要包括儲液器(用于貯存流動相)、高壓輸液泵(核心部件,負責以高壓形式將流動相連續(xù)不斷地打入系統)和脫氣裝置(用于去除流動相中溶解的氣體,防止在檢測器中形成氣泡干擾檢測)。高性能的泵系統,如Agilent 1260 Infinity III Prime液相色譜系統所配備的,能提供精確而準確的梯度性能,以及高達5 mL/min的流速和800 bar的壓力范圍。
2.進樣系統:通常為自動進樣器,能將樣品溶液精確、重復地注入流路中,避免手動進樣帶來的誤差。現代自動進樣器,如1260 Infinity III Multisampler,還具有多重清洗功能,能將交叉污染降至10 ppm以下。
3.分離系統:即色譜柱,是整個色譜系統的心臟。其內部填充有微米級的高效微粒固定相(如硅膠或鍵合相硅膠),柱效可達每米5000塔板數以上。色譜柱的質量優(yōu)劣直接影響到分離的效果。
4.檢測系統:檢測器負責將色譜柱流出的組分轉變?yōu)榭蓽y量的電信號。常見的檢測器包括紫外-可見光檢測器(UV-Vis/DAD)、熒光檢測器(FLD)、示差折光檢測器(RID)和蒸發(fā)光散射檢測器(ELSD)等。選擇取決于被測物的性質。
5.數據處理系統:現代HPLC均配備色譜數據工作站(CDS),不僅用于采集、處理和報告數據,還能參與儀器的自動控制和方法運行,符合如21 CFR Part 11等法規(guī)遵從性要求。
性能特點:四大優(yōu)勢彰顯技術魅力:
•高壓:使用高壓泵輸送流動相,系統壓力可達150–300 kg/cm²,這是實現高速和高效分離的前提。
•高速:分析速度顯著加快,流速通常在0.1–10.0 mL/min之間,分析一個樣品一般在15–30分鐘內完成,有些甚至只需5分鐘。
•高效:由于使用了粒度更細、更均勻的固定相(如亞2µm填料),柱效大幅提高,塔板數可達每米5000以上,能在一根色譜柱中同時分離成分達100種。
•高靈敏度:現代檢測器靈敏度,紫外檢測器可達0.01ng,熒光和電化學檢測器甚至可達0.1pg級別,同時樣品消耗量很少。
此外,HPLC還具有分辨率高、色譜柱可反復使用以及樣品回收方便(樣品經過色譜柱后通常不被破壞)等優(yōu)點。
應用領域:
•制藥與生物醫(yī)藥:這是HPLC應用泛和深入的領域。從藥物研發(fā)(鑒定藥物靶標、純化生物活性物質)、生產質量控制(原料藥純度分析、制劑溶出度研究)到雜質和降解產物分析,HPLC都是確保藥品安全有效的關鍵工具。在生物制藥領域,它還用于肽圖分析、抗體分析以及寡核苷酸鑒定和定量。
•食品科學:用于分析食品中的營養(yǎng)成分(如蛋白質、氨基酸、糖類、維生素)、食品添加劑(如甜味劑、防腐劑、著色劑)以及污染物(如霉菌毒素、農藥殘留),保障食品安全和質量。
•環(huán)境監(jiān)測:用于鑒定、監(jiān)測和定量分析水和土壤中的有機污染物,如多環(huán)芳烴(PAHs)、農藥殘留、全氟和多氟烷基物質(PFAS)等,為環(huán)境保護提供科學依據。
•臨床研究與法醫(yī)毒理學:臨床實驗室利用HPLC分析復雜的生物液體(如血液、血漿、血清),以協助開發(fā)靶向精準藥物。法醫(yī)和毒理學實驗室則依靠其篩查、定量和確認與調查及藥物濫用相關的物質。
分析型高效液相色譜儀作為現代分析科學的支柱技術,其精密的分離能力、靈活的配置選項和廣泛的適用性,使其成為科學家手中解開復雜物質組成奧秘的鑰匙。隨著技術的不斷融合與創(chuàng)新,HPLC將繼續(xù)推動科學研究和質量控制的進步,在各個領域發(fā)揮不可替代的作用。
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